戴安液相色譜柱需要注意的地方 戴安液相色譜柱的使用和維護(hù)十分重要，液相色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響柱子的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
戴安液相色譜柱的正確使用：(1)柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度，必須防止較強的機械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。(2)如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常 規(guī)分析配置一根柱，這樣有助于延長柱子的壽命。(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動，溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況，柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因 此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
戴安液相色譜柱應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳唬缡褂弥鶞乜刂蒲b置時，應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫，一般說來戴安液相色譜柱不能反沖，只有生 產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效，選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使 流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換，經(jīng)常用強溶劑沖洗戴 安液相色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL，保存戴安液相色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充 滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置或更長時間。
戴安液相色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi)，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷， 死體積增大，在完成分離分析工作之后，不應(yīng)立即停機，需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，一般0.5h以上，以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
由于懸浮在樣品或流動相中的細(xì)小顆粒會堵塞戴安液相色譜柱兩端的篩板，因此在進(jìn)行色譜分離前，應(yīng)保證樣品和所用的流動相具有較高的潔凈度。樣品在進(jìn)樣前應(yīng)對其進(jìn)行簡單的針筒過濾；流動相的純度至少應(yīng)該 達(dá)到分析純，推薦使用色譜純的試劑。在對樣品進(jìn)行分離前必須對流動相樣品的pH值進(jìn)行測試，確保流動相的pH值應(yīng)在色譜柱允許范圍內(nèi)，不至于造成基質(zhì)的流失和塌陷。當(dāng)必須要在pH值適用范圍的邊界（特別是pH值 在8.0~10.0時）條件下使用液相色譜柱時，每次使用結(jié)束后應(yīng)立即用適合于戴安液相色譜柱保存并與所使用的流動相互溶的溶劑淋洗，并*置換掉原來所使用的流動相。
