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流式檢測 T 細胞增殖的技巧
  • 發布日期:2018-05-21      瀏覽次數:2740
    • 集中于 T 細胞的許多基礎和臨床免疫研究包括增殖測定,都是為了確定 T 細胞是否能夠在不同的體外或體內條件下增殖。流式細胞儀術是測量 T 細胞增殖的理想方法,現在有一套染色產品,可以在現有的流式細胞儀染色板中加入增殖染料。與所有流式細胞術染色步驟一樣,一定要做一個預實驗確定染色試劑的用量和確定采集的細胞數,在下一個 T 細胞實驗確定使用其中的一個染色方案來檢測細胞的增殖 。

      胞內熒光染色:

      羧基熒光素二乙酸酯琥珀酰亞胺酯(CFSE)或類似的熒光染料是可以進入活細胞內的。在增殖期間,隨著細胞分裂熒光染料的濃度也隨之稀釋,并且可以在流式細胞檢測分析時作為離散峰測量多次細胞分裂。當您在預實驗中檢測這些染料時,需確保這些增殖染料不影響細胞活性或形態。

      流式檢測T1.jpg

      DNA 合成:

      細胞增殖還可以通過胸苷合成類似物 5-溴-2'-脫氧尿苷(BrdU)檢測細胞周期 S 期的 DNA 合成量來測定。通常在細胞培養中添加 BrdU 以確定體外增殖,并且使用抗 BrdU 的二抗與細胞內因子結合來測量 BrdU 摻入。

      流式檢測T2.jpg

       

      以上 T 細胞增殖方法的可能有一種更適合您正在進行的實驗,或者可用于您的流式細胞儀。每種方法都相對容易應用到您的下一個實驗,并可以根據該檢測更好地了解細胞功能。
       

    魏經理
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