色谱柱-淋洗液罐-巴罗克试剂槽-巴氏吸管-5ml样品瓶-SBS液氮冻存管-上海希言科学仪器有限公司

產品展示
PRODUCT DISPLAY
技術支持您現在的位置:首頁 > 技術支持 > 細胞血清培養基和無血清培養基的配制以及區別
細胞血清培養基和無血清培養基的配制以及區別
  • 發布日期:2018-01-17      瀏覽次數:3031
    • 細胞培養基是如何配制的?培養細胞的*培養基由基礎培養基和添加劑(如血清或無血清培養用的某些確定的激素及生長因子)組成,培養基的配方一直在改進,其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。 
       
      基礎培養基  絕大多數培養基是建立在平衡鹽溶液基礎上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。zui廣泛應用的培養基是邁健基礎培養基和邁健培養基營養添加物的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而邁健培養基也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規含有無機鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)?,F應用于快速生長的細胞,同培養基含有相同的營養成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養基,應仔細了解成分表,應知道大多數情形下培養基都有不足。例如,有些培養基在氨基酸中包括有谷氨酸,而這種培養基雖廣泛用于神經生物學領域,但它對某些對谷氨酸敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經元而言,則并非*選擇,特別是如果神經元生長在缺乏膠質的環境中時。F12中含有硫酸亞鐵,據報道也有神經毒效應。 
       
      在所有這些培養基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的濃度,這是因為它具有不穩定性以及在許多細胞培養中它常用作碳源。對于神經元的培養常常在基礎培養基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(若培養基中這兩種物質缺乏時)。但通常在原代培養中使用也能有比較令人滿意的結果。  
      血清  
      細胞在單純的基礎培養基中不能存活,在特殊類型的細胞培養中必須提供某些痕量營養物質及生長因子才能使細胞得以生長并維持生長狀態?;A培養基常常要添加血清,血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來源須用經驗確定,廣泛應用的血清種類有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子,常選其作增殖細胞用的血清,也用于細胞系和原代培養。而馬血清常常用來作有絲分裂后的神經元培養。然而,很多人也將胎牛血清用于神經元培養,也有人用馬血清來培養膠質細胞。用大鼠進行神經元培養的某些研究者喜歡使用同型血清;人類的胎盤血清,亦曾用于神經組織的器官類型的培養,也用在一些特殊培養種類中。 
       
      血清培養基存在一定的弊端,無法規避動物血清中的異源體,如果使用動物血清培養基培育出來的細胞輸入人體,所以可能存在人體異源體排斥和沖突,有一定風險,現如今該研究領域為了規避這樣的風險,研究發明了細胞無血清培養基,取代血清培養基的不利因素。 
       
      無血清培養基  
      1979年神經細胞培養出現了一個重要進展,用化學添加劑即可維持神經細胞存活與生長而不需要在培養基中添加血清。其工作基礎是用合適的激素、營養物和促貼壁的物質的組合置換培養基中的成分,zui后找到了適合大多數細胞培養的試劑配方,該配方稱為N2,專門用于神經細胞培養,添加了胰島素、轉鐵蛋白、黃體tong、腐胺和硒。胰島素和胰島素樣生長因子對于大多數類型細胞的存活和生長有重要作用,硒是谷胱甘肽產生的合作因子,可能有助于過氧化物和超氧化物的水解,有報道說還能防止細胞的光照損傷。 
       未料到的是上述配方構成的培養基可以支持神經母細胞瘤細胞系快速增殖,隨后又發展了能支持原代培養的各種神經元生長的培養基,這種培養基在許多實驗室里已取代了有血清培養。在某些培養方案中,細胞直接進入無血清培養,這樣的培養基可以消除來自血清的不均一性。更為重要的是,它們可用來檢測生長因子以及其他促進神經元存活或生長的因子,或者用來檢測那些可保護神經元免遭環境毒物損傷的制劑。于神經元的培養基在某些培養環境中還可以減低非神經元細胞的增殖,故可使神經元純化。
      血清中含有的組分,例如血清蛋白,可作為代謝毒物清除劑使用并能聚集于培養基中。當缺乏這些成分時,如神經元在無血清培養基中生長時,特別容易為過氧化物及自由基傷害,這已被許多研究者注意到了。過氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培養基中過氧化物和超氧化物的累積,有報道講可以促進低密度培養細胞的存活。有學者發現細胞存活可為氧分壓的下降而促進。因而,無血清培養基的配方常含有抗氧化劑的試劑。例如,維生素E和丙酮酸,可作為過氧化物清除劑使用。上述這些影響在高密度培養時變小,特別是神經元與膠質共培養時,它們可以吸收和代謝神經元毒性物質如谷氨酸。 
       應該注意,盡管無血清培養基是有化學限定性的,但在培養過程中它仍有變動,培養起始時可能有些物質缺乏,而后細胞的產物可能積累,從而使培養基的成分改變。這其實是有另一方面的好處,即條件培養基(已培養過細胞的培養基)的形成,條件培養基常常用來增加神經元和膠質細胞的發育。生長因子絕大多數哺乳類胚胎神經元有嚴格的營養要求,若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分,將會使絕大多數神經元在體外培養的數天中死亡。解決這一問題有兩條思路,一是讓培養細胞提供自己的營養因子,二是在培養基中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長,所需的生長因子便會積累到可觀的數值,尤其當培養基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養需求,可保持培養基在一段時間里不作任何變動,以使營養(生長)因子積累,而zui后促使所需要的細胞類型能夠生長。但是,這種對營養(生長)因子自身倚賴性亦有弊端,因為通常在混合細胞群體中細胞很難有同比例增殖,某些細胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進行相當高密度的細胞培養。因為培養基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經元群體的低密度培養可用條件培養基(經過了高密度培養)進行,或在膠質上生長的神經元所用過的培養基來支持。

    魏經理
    • 手機

      13224517959

    主站蜘蛛池模板: 雨燕360体育免费直播_雨燕360免费NBA直播_NBA篮球高清直播无插件-雨燕360体育直播 | TPU薄膜_TPU薄膜生产厂家_TPU热熔胶膜厂家定制_鑫亘环保科技(深圳)有限公司 | 预制舱-电力集装箱预制舱-模块化预制舱生产厂家-腾达电器设备 | 重庆小面培训_重庆小面技术培训学习班哪家好【终身免费复学】 | 可程式恒温恒湿试验箱|恒温恒湿箱|恒温恒湿试验箱|恒温恒湿老化试验箱|高低温试验箱价格报价-广东德瑞检测设备有限公司 | 艺术生文化课培训|艺术生文化课辅导冲刺-济南启迪学校 | BAUER减速机|ROSSI-MERSEN熔断器-APTECH调压阀-上海爱泽工业设备有限公司 | 浩方智通 - 防关联浏览器 - 跨境电商浏览器 - 云雀浏览器 | 超声波清洗机_细胞破碎仪_实验室超声仪器_恒温水浴-广东洁盟深那仪器 | 艾乐贝拉细胞研究中心 | 国家组织工程种子细胞库华南分库 | led全彩屏-室内|学校|展厅|p3|户外|会议室|圆柱|p2.5LED显示屏-LED显示屏价格-LED互动地砖屏_蕙宇屏科技 | 电脑知识|软件|系统|数据库|服务器|编程开发|网络运营|知识问答|技术教程文章 - 好吧啦网 | uv固化机-丝印uv机-工业烤箱-五金蚀刻机-分拣输送机 - 保定市丰辉机械设备制造有限公司 | 山东齐鲁漆业有限公司【官网】-工业漆专业生产厂家 | 带压开孔_带压堵漏_带压封堵-菏泽金升管道工程有限公司 | 耐酸碱胶管_耐腐蚀软管总成_化学品输送软管_漯河利通液压科技耐油耐磨喷砂软管|耐腐蚀化学软管 | 石栏杆_青石栏杆_汉白玉栏杆_花岗岩栏杆 - 【石雕之乡】点石石雕石材厂 | 代理记账_公司起名核名_公司注册_工商注册-睿婕实业有限公司 | 冷油器,取样冷却器,热力除氧器-连云港振辉机械设备有限公司 | 聚氨酯保温钢管_聚氨酯直埋保温管道_聚氨酯发泡保温管厂家-沧州万荣防腐保温管道有限公司 | 咖啡加盟-咖啡店加盟-咖啡西餐厅加盟-塞纳左岸咖啡西餐厅官网 | 杭州高温泵_热水泵_高温油泵|昆山奥兰克泵业制造有限公司 | BHK汞灯-百科|上海熙浩实业有限公司| 衬氟止回阀_衬氟闸阀_衬氟三通球阀_衬四氟阀门_衬氟阀门厂-浙江利尔多阀门有限公司 | 数码管_LED贴片灯_LED数码管厂家-无锡市冠卓电子科技有限公司 | 化妆品加工厂-化妆品加工-化妆品代加工-面膜加工-广东欧泉生化科技有限公司 | H型钢切割机,相贯线切割机,数控钻床,数控平面钻,钢结构设备,槽钢切割机,角钢切割机,翻转机,拼焊矫一体机 | 万师讲师网-优质讲师培训师供应商,讲师认证,找讲师来万师 | 电机修理_二手电机专家-河北豫通机电设备有限公司(原石家庄冀华高压电机维修中心) | 工作服定制,工作服定做,工作服厂家-卡珀职业服装(苏州)有限公司 | 自动钻孔机-全自动数控钻孔机生产厂家-多米(广东)智能装备有限公司 | 北京开源多邦科技发展有限公司官网 | 玻纤土工格栅_钢塑格栅_PP焊接_单双向塑料土工格栅_复合防裂布厂家_山东大庚工程材料科技有限公司 | 高考志愿规划师_高考规划师_高考培训师_高报师_升学规划师_高考志愿规划师培训认证机构「向阳生涯」 | 滚珠丝杆升降机_螺旋升降机_丝杠升降机-德迈传动 | 电加热导热油炉-空气加热器-导热油加热器-翅片电加热管-科安达机械 | 实验室装修_实验室设计_实验室规划设计- 上海广建净化工程公司 | 青岛球场围网,青岛车间隔离网,青岛机器人围栏,青岛水源地围网,青岛围网,青岛隔离栅-青岛晟腾金属制品有限公司 | 服务器之家 - 专注于服务器技术及软件下载分享 | 仿古瓦,仿古金属瓦,铝瓦,铜瓦,铝合金瓦-西安东申景观艺术工程有限公司 | 西门子伺服电机维修,西门子电源模块维修,西门子驱动模块维修-上海渠利 |